如何做好免疫组化染色（建议免疫组化染色进一步明确诊断）-小美百科

大家好，今天来给大家分享如何做好免疫组化染色的相关知识，通过是也会对建议免疫组化染色进一步明确诊断相关问题来为大家分享，如果能碰巧解决你现在面临的问题的话，希望大家别忘了关注下本站哈，接下来我们现在开始吧！

1抗原修复的作好免疫组化染色必须注意的问题

1、V、切片必须烘烤附贴牢固，既要经得起抗原修复时高温的作用而不使轻易脱片，又不至于破坏抗原。应用于免疫组化染色的切片。

2、做免疫组化前需要注意的方面：抗原有无丢失主要看组织切片的新鲜程度，一般切片室温保存超过3-6个月，可能切片内的抗原丢失很严重，此时可以通过重新用石蜡块切片来进一步验证（蜡块需要低温保存）。

3、组织内待测抗原已被分解破坏，或抗原含量过低；2）抗原被遮盖，多由于醛类固定剂的使用，使组织中的大分子蛋白借醛键形成交联而遮盖待检抗原；3）抗体质量不佳或稀释度不当；4）技术操作失误等。

4、另外，最好不要选择冰冻剩余组织或脱钙组织，冰冻或脱钙一般也会影响组织内的抗原。

5、由此表明：制作出合格的免疫组化切片不仅仅是技术员的事，病理医生也起着不可缺少的作用。（2）、染色过程中的某一或某些环节出了问题。

、抗体浓度过高：一抗浓度过高是常见的原因之一。

染色失败的几种情况及原因：所染的全部切片均为阴性结果，包括阳性对照在内。所有切片均呈阳性反应。所有切片背景过深。阳性对照染色良好，检测的阳性标本呈阴性反应。

参考见解：最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。（1）空白对照：如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。

以下是注意事项：固定时间：固定的时间一般在1-2小时左右，不宜过长。固定时间过长会导致组织硬化，影响后续的制片过程。固定剂的浓度和pH值：应根据组织类型和固定剂的种类选择合适的浓度和pH值。

影响免疫组化染色质量的因素有很多，在实验中应注意组织的取材和固定，选择质量好的商品化抗体，恰当地选择和使用封闭和抗原修复手段，严格的技术操作和对照等。1。

通常情况下，良性肿瘤大概增殖大于5％或者小于10％左右，恶性肿瘤一般情况下细胞增殖大于10％，但是有一些低度恶性的肿瘤，其Ki67的表达率可能低于5％，大部分情况Ki67的增殖，随着肿瘤细胞的恶性程度增高而增加。

封闭 5%BSA封闭液 37℃ 30min，甩干不洗。孵育一抗 TBS或PBS稀释一抗。4℃湿盒过夜。孵育二抗 TBS 5min×5。 3%H 2 O 2 滴加于切片上，室温避光10min。

另外，最好不要选择冰冻剩余组织或脱钙组织，冰冻或脱钙一般也会影响组织内的抗原。

实践证明，高压处理技术应用于免疫组织化学具有经济、简便、阳性率高、定位准确、染色清晰等优点，容易推广应用。

标本的固定为了更好地保持细胞和组织原有的形态结构，防止组织自溶，必须对标本进行固定。标本固定的好坏是影响病理诊断的关键，同样也影响免疫组化的结果，所以固定是质控的首要也是关键步骤。

【答案】：（1）原料品种（2）浆料的打浆度（3）浆料PH值（4）施胶（5）温度（6）染料的稀释用水（7）填料（8）纸机的生产条件。

关于如何做好免疫组化染色的内容到此结束，希望对大家有所帮助。